HPLC

Preparación de la muestra de jugo

El limón empleado para la muestra fue cortado por la mitad y una de estas mitades fue exprimida para el análisis cromatográfico. Para alcanzar una solución uniforme, sin pulpa de fruta se centrifugó el zumo a 4000xg por 10 min a temperatura ambiente. Se recolectó el sobrenadante obteniendo un volumen final de 2.5 mL. Este volumen se llevó a un balón de 25 mL con la fase móvil, en una dilución 1:10. Antes de la inyección en el equipo, la muestra se filtró por una membrana (0.45 µm). Se realizó un duplicado del análisis.

Equipo

Para la cuantificación del ácido cítrico en zumo de limón se empleó un sistema High Performance Liquid Chromatography Primaide Hitachi ® , con detector UV (lámpara de Hg) a  λ = 214 nm (a esta longitud de onda también fue posible observar el ácido benzoico presente en el zumo). La columna RP-HPLC Phenomenex - Kinetex ® 2.6 µm C18  100 Å, 100 x 4.6 mm fue utilizada para el ensayo.

Preparación de la fase móvil 

Se prepararon dos soluciones buffer fosfato 20 mM a utilizar como fase móvil:
Estas dos soluciones se mezclaron para equilibrar la columna cromatográfica y realizar el posterior análisis.
Las soluciones estándar preparadas se llevaron a volumen con una tercera solución buffer preparada:

Soluciones estándar

Se preparó una solución stock de 40104.00   ±  128.40 mg/L, pesando 1.0036 g  ±  0.0001 g de ácido cítrico llevados a 25.00 mL  ±    0.08 mL

Resultados y Discusión

Conclusiones

Referencias Bibliográficas