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\begin{document}

\title{Principais achados cient\selectlanguage{ngerman}íficos referentes~à relação entre a~exposição
ao~Bisfenol A~e~o processo carcinogénico no~cancro da mama~~~~~\selectlanguage{portuguese}}



\author[1]{Ana Ferreira}%
\author[1]{Mariana Almeida}%
\author[2]{Maria Fraga}%
\affil[1]{University of Aveiro}%
\affil[2]{Affiliation not available}%


\vspace{-1em}



  
  \date{May 08, 2024}


\begingroup
\let\center\flushleft
\let\endcenter\endflushleft
\maketitle
\endgroup





\selectlanguage{portuguese}
\begin{abstract}
O \,Bisfenol~A \,(BPA) \selectlanguage{ngerman}é um composto aromático largamente
utilizado\,na\,produção industrial de artigos plásticos. A sua presença
em\,objetos\,usados no quotidiano,\,como latas de comida ou garrafas de
água, tem gerado preocupação nos últimos anos, pois, sob determinadas
condições, este pode ser libertado para o meio e entrar no
organismo.~Este composto é considerado um disruptor endócrino, uma vez
que, dada a sua semelhança estrutural, é capaz de mimetizar as ações do
estrogénio no organismo. Diversos estudos baseados em modelos animais e
culturas celulares têm vindo a relatar as suas propriedades
carcinogénicas~ao nível do cancro da mama, esta~que é a neoplasia mais
frequente em mulheres,\,afetando\,mais de dois milhões~mundialmente.~

Os mecanismos pelos quais o BPA está envolvido na\,tumorogénese\,podem
ser exercidos através de alterações epigenéticas e modificação de vias
celulares, provocando efeitos~nas~células estaminais presentes na
glândula mamária, bem como alterações histológicas na mesma. De entre os
seus efeitos, destacam-se o aumento da proliferação celular,\,diminuição
da expressão de proteínas de adesão,\,alteração da expressão de genes
que codificam reguladores do ciclo celular ou supressores de tumor e a
promoção da invasão e\,metastização.~

Conjuntamente, as alterações decorrentes da exposição ao BPA aumentam o
risco de desenvolvimento de cancro da mama.\,Embora muitos
mecanismos\,ainda não estejam compreendidos, com este artigo pretende-se
combinar os conhecimentos atuais acerca do modo como o BPA \,influencia
o processo carcinogénico do cancro da mama,\,através da sua ação no
recetor de estrogénio.\,~%
\end{abstract}\selectlanguage{ngerman}%



\sloppy


\textbf{Palavras-Chave:}~BPA, cancro da mama, RE\selectlanguage{greek}α, \selectlanguage{english}RE\selectlanguage{greek}β, \selectlanguage{english}GPER, c\selectlanguage{ngerman}élulas
estaminais.~

\section*{Afiliação}

{\label{270716}}

Almeida, M.~\textsuperscript{1} , Ferreira, A.\textsuperscript{1} ,
Fraga, M.~\textsuperscript{1}~

\textsuperscript{1}Departamento de Ciências Médicas, Universidade de
Aveiro, Aveiro, Portugal~ ~~

\section*{INTRODUÇÃO\,~~}

{\label{928378}}

O cancro da mama assume especial relevância, dado ser a neoplasia mais
frequente em mulheres. Este tumor maligno afeta cerca de\,2.08\,milhões
de mulheres a nível mundial, sendo registados, aproximadamente,
\,522.000 casos só na Europa~\hyperref[csl:1]{(1)}.\,Estima-se que, nos
dias de hoje, uma em cada oito mulheres seja\,confrontada com o
diagnóstico de cancro da mama, ao longo da sua vida. Embora\,há\,apenas
algumas décadas esse diagnóstico fosse acompanhado, quase sempre, de um
prognóstico fatal, na atualidade, é possível esperar que os pacientes
tenham uma expectativa de vida normal. Esta melhoria significativa do
prognóstico deve-se, principalmente, aos avanços feitos nos campos do
tratamento e diagnóstico precoces~~\hyperref[csl:2]{(2)}.

~

Cerca de 70\% dos cancros diagnosticados são positivos para os recetores
hormonais, recetor\,de\,progesterona (RP)\,e\,recetor de
estrogénio\,(RE), sendo que\,os\,cancros RE+ são os mais comuns.\,Os
pacientes com cancro da mama\,podem ser subdivididos em\,quatro
subtipos, tendo em conta a\,heterogeneidade\,dos genes
RP\,e\,RE\,--\,Luminal\, A (RE+ ou RP+, HER2-);\,Luminal \,B (RE+
ou\,RP+, HER2+);\,RE+,\,RP+, HER2+ ou\,Triple Negative\,(RE-,\,RP-,
HER2-).\,Um prognóstico pior é associado aos últimos dois subtipos,
enquanto que o melhor prognóstico\,é apresentado pelo subtipo\,Luminal
\,A \hyperref[csl:3]{(3)}.\,~{Breast\,Cancer:\,From\,Biology\,to Medicine.
1st ed.\,Croatia:\,Phuc\,Van\,Pham; 2018. 568p.\,~}

~

De acordo com a\,Endocrine\,Society,\,um disruptor endócrino químico
(DEQ) define-se como um químico ou mistura de químicos exógenos que
interferem com algum aspeto da ação hormonal ~\hyperref[csl:4]{(4)}.
Diversos estudos têm relatado o impacto de alguns disruptores no
processo carcinogénico, considerando-os importantes fatores de risco
para o desenvolvimento de tumores. O\,bisfenol A, do
inglês~Bisphenol~A~(BPA),~é um DEQ que mimetiza as ações do estrogénio
nos seus recetores, afetando diretamente a função neuroendócrina dos
órgãos alvo. O BPA tem sido alvo de preocupação nos últimos anos devido
à sua vasta presença no ambiente. Desde que foi sintetizado pela
primeira vez,\,em 1891, este composto aromático tem sido largamente
utilizado pela indústria como monómero em artigos plásticos, como
policarbonatos e resinas\,epoxy,\,que integram,\,por exemplo,\,garrafas
de água, latas de comida e alguns brinquedos. Estes monómeros podem ser
libertados para o meio, sob diversas condições, como temperatura
elevada, manipulação física e uso repetitivo dos materiais\, dos quais
são constituintes, sendo que, se forem libertados para alimentos, podem
ser posteriormente ingeridos\,pelo ser humano.\,Além disso, podem ainda
entrar no organismo por contacto dérmico\,ou pelo trato
respiratório~\hyperref[csl:5]{(5}; \hyperref[csl:6]{6)}~

Vários estudos reportam a existência deste DEQ em fluidos corporais de
uma grande parte da população mundial,\,como por exemplo\,um
estudo\,em\,que\,se detetou a presença de BPA\,em 95\% das 394 análises
realizadas em humanos~\hyperref[csl:7]{(7)}.~

Alertados para este problema, tanto
a\,Environmental\,Protection\,Agency\,(EPA)~dos EUA como
a\,European\,Food\,Safety\,Autorithy\,declararam limites máximos diários
de ingestão de BPA,\,respetivamente 50\,\selectlanguage{greek}μ\selectlanguage{english}g e 4\,\selectlanguage{greek}μ\selectlanguage{english}g por quilograma de
peso corporal.\,No entanto,~ estudos reportam que,\,mesmo nessas
quantidades, este DEQ pode ter feitos nocivos~\hyperref[csl:6]{(6}; \hyperref[csl:4]{4)}.

\,~
\selectlanguage{ngerman}
{Dada a incidência do cancro da mama nas mulheres e \,a\,presença
assídua do BPA no dia-a-dia,\, o estudo da\, sua influência no
desenvolvimento do cancro~mamário\,tem ganho destaque na comunidade
científica.\,~Assim,~nas últimas
décadas,~foram\,realizados\,diversos\,estudos~que
permitiram\,concluir~que~existe~uma relação entre a exposição de células
mamárias ao BPA e o\,desenvolvimento\, neoplásico sendo que este exerce
as suas ações através do RE.~~}

{~}

{Em estudos experimentais,~observou-se~que~o tratamento~de linhas
celulares RE+, como a MCF-7,~com BPA aumentava a viabilidade,
proliferação e migração celulares, e induzia
alterações\,morfológicas~nestas linhas.~Em\,linhas celulares que não
expressavam\,RE, como a MDA-MB-231, estes resultados não foram
observados.\,As linhas celulares positivas para o RE
que~foram\,tratadas,\,simultaneamente,\,com BPA e inibidores do RE,\,não
se verificaram quaisquer alterações induzidas por este
DEQ\,\,~}\hyperref[csl:8]{(8}; \hyperref[csl:9]{9}; \hyperref[csl:10]{10)}{~.}

\par\null

{ Uma vez estabelecida a relação entre\,a exposição ao BPA e~o
desenvolvimento de neoplasia mamária,~tornou-se fulcral estudar os
mecanismos que explicam as alterações observadas nas células da glândula
mamária.\,\,~Deste modo,\,este\,artigo foca-se nos efeitos histológicos,
epigenéticos e celulares do BPA, por ação no RE, e a sua relação com o
desenvolvimento de cancro da mama.\,~}

\par\null

\section*{~Lista de abreviaturas\, --\textgreater{} meter a seguir ao
abstract}

{\label{145711}}

BPA:\,Bisfenol A~

BTs: Brotos Terminais

CEMas: Células~Estaminais~Mamárias~

CEMs: Células~Estaminais~Mesenquimais~

CEMH: Células Epiteliais Mamárias Humanas~

DEQs: Disruptores Endócrinos Químicos~

DLA: Domínio\,de Ligação ao ADN~

DLL: Domínio de Ligação ao Ligando

E2: 17\selectlanguage{greek}β-\selectlanguage{english}estradiol\,

EGFR: Recetor do Fator de Crescimento Epid\selectlanguage{ngerman}érmico

ERE:\,Elementos de\,Resposta ao\,Estrogénio\,

ERR\selectlanguage{greek}γ:\selectlanguage{english}~Estrogen-related~receptor~Gamma~

ERRE:\,Estrogen-related\,Receptor\,Response\,Element\,~

EZH2:\,Enhancer of\,Zeste\,Homolog 2\,

GPER: Recetor de Estrog\selectlanguage{ngerman}énio Acoplado à Proteína G

HER2:~Receptor-2 do~Fator~de~Crescimento~Epidérmico~Humano~

PCNA:\,Proliferating\,Cell\,Nuclear\,Antigen\,~

p-MDM2:\,Phospho-Murine\,Double\,Minute\,2\,~

PMOs: Proteínas Morfogénicas Ósseas\,~

PTEN:~Phosphatase and\,Tensin\,Homolog Deleted\,on Chromosome Ten\,~

RE:\,Recetor de\,Estrogénio~

RP:\,Recetor de\,Progesterona\,\,~

RPMO: Recetor das Proteínas Morfogénicas Ósseas~

VEGF: Fator de Crescimento Endotelial~ Vascular

~

~

\section*{1. Efeitos~estrogénicos~do
BPA~}

{\label{326329}}\par\null

\subsection*{1.1 Ligação do BPA aos recetores de
estrogénio}

{\label{716453}}

~

A via de sinalização genómica clássica do estrogénio é desencadeada pela
ligação deste\,ao\,RE\selectlanguage{greek}α \selectlanguage{english}ou RE\selectlanguage{greek}β, \selectlanguage{english}que atuam como fatores de transcri\selectlanguage{ngerman}ção no
núcleo. Na ausência de ligantes,\,os\,REs\,são complexados com moléculas
inibidoras no citoplasma ou no núcleo. Após a ligação\,do\,ligante,
esses complexos dissociam-se, resultando em alterações conformacionais,
que permitem a ligação ao ADN e o recrutamento de cofatores para regular
a expressão dos genes alvo~ ~ ~\hyperref[csl:11]{(11}; \hyperref[csl:12]{12)}\, ~.

~

Contudo, os RE\selectlanguage{greek}α\selectlanguage{english}\,e\,RE\selectlanguage{greek}β \selectlanguage{english}tamb\selectlanguage{ngerman}ém são capazes de iniciar uma via de
sinalização não genómica fora do núcleo, dependendo da sua
localização\,subcelular. Além disso, a sinalização de estrogénio também
pode ser mediada por outros recetores, como recetor de estrogénio
acoplado à proteína G, do
inglês~G~Protein-Coupled~Receptor~for~Estrogen~(GPER)\,\,
~\hyperref[csl:13]{(13)}~.

O\,BPA exerce\,a\,sua atividade interrompendo a via de sinalização
de\,estrogénio\,que usa o\,RE\,como fator de transcrição, o qual se liga
aos locais dos elementos de resposta ao estrogénio (ERE)\,presentes\,no
ADN. Consequentemente,\,pensa-se que o BPA~
atua,\,principalmente,\,através da sua ligação ao RE\selectlanguage{greek}α, \selectlanguage{english}o principal
recetor nuclear de estrog\selectlanguage{ngerman}énio~\hyperref[csl:13]{(13)}.

~

O BPA é um composto\,difenil\,com dois grupos hidroxilo na
posição\,para, razão\,pela qual este é altamente semelhante ao
estrogénio sintético, a nível estrutural. Esta semelhança permite que o
BPA seja capaz de interagir com os recetores fisiológicos, como
os\,REs~\hyperref[csl:13]{(13)}.\,\,O RE é uma proteína de múltiplos
domínios\,que\,consiste num domínio N-terminal com locais de ligação
para\,correguladores\,da transcrição; um domínio\,central\,C\,de ligação
ao ADN\,(DLA),\,responsável pelo reconhecimento do gene alvo; um
domínio\,``dobradiça'' intermediário\,(D) e um domínio C-terminal de
ligação ao ligando\,(DLL)\,E/F. O domínio E/F forma uma segunda
superfície de dimerização do recetor e é um importante local de
interação do\,corregulador~~\hyperref[csl:14]{(14)}.\,

~

O BPA age como um agonista do\,RE\selectlanguage{greek}α,\selectlanguage{english}\,fazendo com que o dom\selectlanguage{ngerman}ínio de
ligação ao ligando (DLL) sofra\,o mesmo deslocamento que o
17\selectlanguage{greek}β-\selectlanguage{english}estradiol~ (E2\,) produz. Contudo,\,o BPA n\selectlanguage{ngerman}ão permite que o DLL
do\,RE\selectlanguage{greek}β \selectlanguage{english}assuma a conforma\selectlanguage{ngerman}ção correta\,e, por isso,\,age\,como um
antagonista\,deste recetor.\,O\,deslocamento adequado do\,DLL é
necessário\,à modulação competente\,da transcrição\,pelo RE e, assim,\,o
BPA pode levar ao recrutamento de \,coativadores\, ou
\,correpressores,\, dependendo se atua como\,agonista ou
antagonista.\,Consequentemente,\,a ligação do BPA ao RE
provoca\,diferenças na atividade reguladora da expressão
genética~\hyperref[csl:11]{(11)}.\,

~

Com base em estudos experimentais, recorrendo a células
MCF-7~\hyperref[csl:15]{(15)},~o BPA pode ligar-se ao RE e ser também um
modulador alostérico, apresentando~não só consequências nos domínios
separados, como também na comunicação cruzada entre\,DLL, DLA
e\,o\,ADN.\,Ademais, a\,ligação do\,composto\,pode alterar a dimerização
através de uma mudança crucial nas conexões entre resíduos
e\,intra-resíduos, incluindo ligações de\,hidrogénio\,e outras
interações\,entre átomos próximos ~\hyperref[csl:14]{(14)}.

~

A afinidade de ligação é considerada um dos principais critérios para
determinar se produtos químicos são DEQ, como o BPA.\,Este\,apresenta
uma afinidade de ligação com DLL do recetor hormonal\, 1500 a 2500 vezes
menor à afinidade do\,E2 para o RE~\hyperref[csl:11]{(11}; \hyperref[csl:12]{12)}. \,Diversos
estudos analisaram os valores de IC50, ou seja, a\,concentração de BPA
\,que causa 50\% de deslocamento do\,E2 do recetor, e a afinidade de
ligação relativa do BPA para os\,REs. Observou-se que, para RE\selectlanguage{greek}α, \selectlanguage{english}o BPA
apresentava\,IC50\,de\,5,98 \selectlanguage{ngerman}× 10\selectlanguage{english}-6\,M,\,sendo que o IC50 do E2 para o
RE\selectlanguage{greek}α\selectlanguage{english}\,\selectlanguage{ngerman}é de\,2,51 × 10\selectlanguage{english}-9\,M. Por sua vez, o valor da IC50 relativo ao
RE\selectlanguage{greek}β\selectlanguage{english}\,\selectlanguage{ngerman}é de 4,43 x10-6\,M para o BPA, enquanto que é de\,4,43 ×
10\selectlanguage{english}-9\,M\,para o E2~\hyperref[csl:12]{(12)}.~

~

Por outro lado, o\,BPA e um dos varios estrogenios ambientais que\,sao
capazes\,de se ligar ao GPER e ativar as vias de transducao\,envolvidas
nas respostas biologicas das celulas normais e neoplasicas, resultando,
por exemplo, na inducao\,de\,quimiorresistencia\,em celulas
de\,cancro\,da\,mama. A\,afinidade de ligacao do\,BPA\,ao\,recetor\,GPER
e~ 8 a 50 vezes maior que a sua afinidade para os\,RE\,\selectlanguage{greek}α\selectlanguage{english}\,e\,RE\selectlanguage{greek}β.\selectlanguage{english}\,O BPA
revelou-se um competidor eficaz do E2, com uma afinidade de liga\selectlanguage{ngerman}ção
relativa ao GPER de cerca de 2\% do E2 e um valor de IC50
de\,6x10-7\,M~\hyperref[csl:16]{(16)}.~

~

\subsection*{1.2 Modificações em Vias
Celulares\,~}

{\label{497665}}

~\selectlanguage{portuguese}
\begin{figure}[H]
\begin{center}
\includegraphics[width=1.00\columnwidth]{figures/Imagem-artigo/Imagem-artigo}
\caption{{This is a caption
{\label{414892}}%
}}
\end{center}
\end{figure}

\selectlanguage{ngerman}\textbf{Figura 1: Principais Efeitos Estrogénicos do BPA.} O BPA liga-se
aos recetores de estrogénio (RE\selectlanguage{greek}α \selectlanguage{english}e RE\selectlanguage{greek}β\selectlanguage{english}) nucleares e localizados na
membrana e, atrav\selectlanguage{ngerman}és da via genómica e não genómica, leva a alterações em
diversos alvos celulares, aumentando propensão para o desenvolvimento do
processo carcinogénico. A via genómica atua através da alteração da
expressão genética, nomeadamente, alterando a expressão de genes
envolvidos no ciclo celular. Ocorre uma sobreexpressão de oncogenes e um
declínio na expressão de genes supressores de tumores e pró-apoptóticos.
Por sua vez, a via não genómica atua através de diversos mecanismos,
como a libertação de cálcio intracelular e a ativação de várias
proteínas cinases (não representadas).

\par\null

A sinalização do\,RE pode ser categorizada em via genómica e via não
genómica.\,Na via genómica, o RE interage diretamente com o ADN, sendo
que outros fatores de transcrição podem estar envolvidos na ligação
RE-ADN. A via não\,genómica\,é induzida por mobilização intracelular de
cálcio devida\,à exposição ao estrogénio ou à rápida ativação da
produção de AMP\,cíclico\,e várias proteínas\,cinases. A via não
genómica do\,RE\,é induzida pela fosforilação do estrogénio e do\,RE,
mas a ativação desta via\,pode ser induzida por um aumento dependente do
ciclo celular na ativação da p38 MAPK em células
de\,cancro\,da\,mama.\,O RE regula a proliferação celular através dos
genes de proteínas da família da MAPK. Estudos indicam que estes também
desempenham um papel importante na regulação da proliferação de células
cancerígenas. O BPA induz a proliferação do ciclo celular de forma
dependente do RE,~aumentando a expressão dos genes reguladores do ciclo
celular\,ciclina\,D,\,ciclina\,A, CDK1 e CDK2 e\,diminuindo\,a~
expressão do gene supressor de tumores p38, em células MCF-7.\,Foi
observado que\,um\,inibidor da MAPK\,p38 foi capaz de suprimir a
sinalização de BPA, sugerindo que a\,ativação desta via é crucial para a
ativação transcricional mediada\,pelo\,RE,\,e que\,o BPA mimetiza a
atividade\,estrogénica\,através
da\,MAPK\,p38.\,\hyperref[csl:12]{(12)}

\par\null

Um pequeno pool de RE\selectlanguage{greek}α \selectlanguage{english}e RE\selectlanguage{greek}β \selectlanguage{ngerman}é\,palmitoilado\,e localizado na membrana
plasmática em associação com a\,caveolina\,1. Vários dados sustentam que
a atividade estrogénica dependente de BPA flui através da ativação de
sinais\,extranucleares\,mediados por RE\selectlanguage{greek}α, \selectlanguage{english}os quais resultam na
fosforila\selectlanguage{ngerman}ção de ERK/MAPK e AKT. Portanto, o BPA mimetiza o E2 ao
ligar-se ao RE\selectlanguage{greek}α, \selectlanguage{english}levando \selectlanguage{ngerman}à ativação de vias\,extranucleares\,rápidas (ou
vias não genómicas). Outro exemplo de ação do BPA pelos
mecanismos\,extranucleares\,do RE\selectlanguage{greek}α \selectlanguage{ngerman}é a libertação de cálcio dos locais
de armazenamento intracelulares, levando a alterações na motilidade
celular, nos processos de sinalização e na exocitose. Contrariamente, no
RE\selectlanguage{greek}β,\selectlanguage{english}~ ~ ~o BPA comporta-se como um antagonista do E2, impedindo que~este
sinalize para jusante de vias como a p38/MAPK~\hyperref[csl:11]{(11)}~.

\,~

O BPA promove a prolifera\selectlanguage{ngerman}ção de células de cancro da mama RE+ e
RE-.\,O\,recetor\,relacionado com o estrogénio \selectlanguage{greek}γ, \selectlanguage{english}do
ingl\selectlanguage{ngerman}ês~Estrogen-related~receptor~gamma~(ERR\selectlanguage{greek}γ\selectlanguage{english})~ pode mediar\,esse efeito
proliferativo, dado que o silenciamento do seu gene\,diminui
significativamente a prolifera\selectlanguage{ngerman}ção celular induzida pelo BPA. Ademais,\,o
BPA pode regular o~mARN~e a expressão proteica de\,ERR\selectlanguage{greek}γ\selectlanguage{english}\,via
ERK1/2.\,O\,ERR\selectlanguage{greek}γ\selectlanguage{english}\, pertence~a~uma superfam\selectlanguage{ngerman}ília de recetores nucleares,
a~ERR,~que atuam\,como~fatores\,de transcrição,\,e\,está\,
sobreexpresso\,em\,células MCF-7 e SkBr3.\,O tratamento com BPA pode
desencadear a translocação nuclear do\,ERR\selectlanguage{greek}γ\selectlanguage{english}\,em c\selectlanguage{ngerman}élulas de cancro de
mama RE+ e RE-. No núcleo, este recetor\,pode regular
a\,homeostasia\,energética e promover a proliferação celular, ligando-se
a várias sequências relacionadas~ao~elementos~de resposta ao recetor
relacionado ao estrogénio (ERRE).\,Um estudo recente indica que a\,MAPK
pode modular\,atividades transcricionais do\,ERR\selectlanguage{greek}γ, \selectlanguage{english}sendo que j\selectlanguage{ngerman}á foi
comprovado que\,o BPA pode ativar a MAPK em várias células.\,Assim,
verificou-se que o\,BPA ativou significativamente\,a\,ERK1/2,\, que
\,medeiam~a proliferação induzida por BPA de células tumorais da
mama~~\hyperref[csl:17]{(17}; \hyperref[csl:18]{18}; \hyperref[csl:19]{19)} \,.

~

À semelhança do estrogénio e compostos estrogénicos, o BPA é capaz de
ativar o GPER, bem como aumentar a sua expressão. Este aumento este que
está associado a tumores de grande tamanho, expressão do HER2/neu e
metástases em cancro da mama. A ativação deste recetor resulta na
ativação de vias como a PI3K, ERK2 e\,Src\,que estão implicadas na
migração das células MCF-7 e TNBC BT-549. Além disso,o BPA ainda aumenta
a formação e o consequente número de~adesões focais, que são requeridas
para a migração das células~\hyperref[csl:20]{(20)}.\,\,Efeitos semelhantes
foram verificados em células cancerígenas SKBR3 que
expressavam\,GPER\,mas não RE. O BPA ativava o ERK pela via de
transdução GPER/EGFR e induzia a expressão dos genes mediados por ela.
Ainda mais, o BPA estimulava a proliferação e migração destas mesmas
células\,\hyperref[csl:21]{(21)}.

~

O HOXC6\,é um gene\,homebox\,associado ao desenvolvimento da glândula
mamária\,que se\,encontra\,sobreexpresso\,em alguns tipos de cancro,~por
exemplo, o cancro da mama~\hyperref[csl:22]{(22)}.\,\,Este gene é responsável
pela regulação de algumas vias de sinalização\,como
a\,PI3K/Akt,\,Notch\,e\,Wnt, bem como da atividade de algumas proteínas
cruciais na proliferação das células tumorais e~no~crescimento
e\,metastização \,tumoral.\,A sua transcrição e consequente atividade é
induzida pelo BPA em células MCF-7, verificando-se também uma
sobreexpressão do HOXC6 em~ratinhos expostos ao BPA. Relativamente ao
mecanismo subjacente, determinou-se neste estudo que o seu~promotor é
responsivo ao\,BPA. A\, modificação de histonas ao\,nível\,deste
promotor,\,bem como\,o\,recrutamento de\,coativadores,\,resulta na sua
ativação e\,consequente aumento da expressão do gene.\,O papel do HOXC6
na\,tumorogénese\,relaciona-se com a ativação\,de fatores de crescimento
tumorais, ademais, este\,gene\,facilita a formação de colónias celulares
tridimensionais~\hyperref[csl:23]{(23)}.\,

~

O HOXB9 é um\,outro\,gene\,homebox\,que exerce um papel importante no
crescimento da glândula mamária e que está relacionado com o
desenvolvimento do cancro da mama. O\,BPA estimula a sua expressão,
tanto na linhagem celular MCF-7 como~na glândula mamária de\,ratinhos,
através da remodelação da cromatina que resulta na estimulação deste
gene~\hyperref[csl:24]{(24)}.\,

\,\,~

Estudos demonstraram que o\,BPA apresenta a capacidade de induzir a
expressão de WNT-4 e de RANKL, duas moléculas chave\,na função
hormonal,\,regulação da proliferação das células estaminais mamárias e
na carcinogénese. A\,sua ação\,disruptora\,no eixo
hipotálamo-hipófise-gónada, ou as suas ações diretas nos órgãos
sensíveis ao estrogénio, podem estar envolvidos
na\,maior\,suscetibilidade do tecido mamária a transformações malignas.
O BPA \,inativou o eixo da proteína supressora de tumores p53, levando a
uma desregulação da proliferação e da morte celular em células
epiteliais\,não malignas\,da glândula mamária.\,O tratamento com BPA
promoveu~ a proliferação e a hipertrofia celulares, e a~ inibição da
apoptose das células da glândula mamária. Além disso, promoveu
a\,quimiorresistência de vários tipos de cancro da mama
RE+\,~\hyperref[csl:25]{(25}; \hyperref[csl:26]{26}; \hyperref[csl:27]{27)}.

\,~

A exposição direta de células RE+ do cancro da mama \,ao BPA afetou vias
de\,sinalização que podem levar ao processo oncogénico, tais como
a\,sinalização do fator de crescimento endotelial vascular, do inglês
Vacular Endothelial Growth Factor (VEGF), associada à\,angiogénese\,e à
sinalização do STAT3, um fator importante na indução da proliferação
celular induzida pelo BPA, que contribui para\,a proliferação das
células cancerígenas~\hyperref[csl:28]{(28}; \hyperref[csl:29]{29)}.

~Certos estudos demonstraram que, através do RE\selectlanguage{greek}α,\selectlanguage{english}\,o BPA
consegue\,sobrerregular\,os n\selectlanguage{ngerman}íveis das proteínas dos\,coativadores\,dos
recetores de esteroides (SRC-1, SRC-3),\,assim\,como promover a
atividade dos ERE. Outros estudos sugeriram que o BPA estimula a
libertação de\,ligandos\,do recetor do fator de crescimento
epidérmico,~do inglês Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR), tendo
como alvos diretos outras moléculas\,para além do\,RE, como ADAM17 e
ADAM10, envolvidas na clivagem dos ligandos deste
recetor~\hyperref[csl:30]{(30)}.\,O tratamento de linhas celulares com BPA
aumentou a expressão da enzima aromatase e, consequentemente, a sua
atividade em fibroblastos mamários saudáveis, levando a um aumento da
biossíntese e secreção de estrogénio~\hyperref[csl:31]{(31)}.~

~Outros autores verificaram que o BPA aumentou a expressão
das\,ciclinas\,D1 e E1, que regulam a proliferação celular por
estimulação das cinases dependentes de ciclinas. Quando o RE estava
bloqueado com o ICI 182,780, um antagonista deste recetor, houve uma
expressão diminuída destas ciclinas, permitindo concluir que\,o BPA
consegue estimular a expressão de genes envolvidos na progressão do
ciclo celular, através de uma via dependente do\,RE. Deste modo,
pensa-se que este mecanismo está envolvido na proliferação das células
da linhagem MCF-7~\hyperref[csl:8]{(8)}.

Além do mais, o BPA induziu alterações morfológicas nas células MCF-7,
as quais adquiriram uma\,spindle-shape\,ou morfologia semelhante a
fibroblastos, perdendo também os contactos célula-célula. \,A expressão
da N-caderina, um marcador mesenquimal,\,aumentou nas células tratadas
com BPA, mas diminui após tratamento com o ICI 182,780. Isto indica que
o BPA induz o\,processo\,de transição epitelial-mesenquimal\,\,nas
células MCF-7, através de uma via dependente do\,RE. Este processo é
crítico para a transformação maligna e para a iniciação de
metástases\,em cancros, como o da mama~\hyperref[csl:8]{(8)}.~

Em suma, tanto em modelos animais, como em linhagens celulares, os
efeitos estrogénicos abordados do BPA ao nível das vias celulares
contribuem para a tumorogénese mamária, principalmente pela sua atuação
nos RE\selectlanguage{greek}α\selectlanguage{english}\,e\,RE\selectlanguage{greek}β \selectlanguage{english}e GPER, sendo que o BPA tem maior afinidade para este
\selectlanguage{ngerman}último, e menor para o RE\selectlanguage{greek}β.\selectlanguage{english}~Este DEQ interfere com a sinaliza\selectlanguage{ngerman}ção das
vias MAPK/p38, ERK1/2, PI3K e VEGF, assim como na expressão dos genes
homebox HOXC6 e HOXB9, bem como de proteínas como WNT-4, RANKL, SRC-1 e
3, ~ciclina D1 e E1 e N-caderina. Os seus principais efeitos consistem
na indução da proliferação celular, dimunuição da expressão de
supressores de tumores, migração celular e indução da metastização.~

~

\par\null

\section*{2. Modificações\,da glândula
mamária\,\,~}

{\label{117682}}

~

A~glândula mamária é formada por ductos e lóbulos constituídos por
células epiteliais~luminais~secretoras, embebidas num estroma
maioritariamente~formado por fibroblastos e
adipócitos~\hyperref[csl:31]{(31)}. O cancro da mama é caracterizado pelo
detrimento da organização das~células epiteliais, acompanhada da perda
de polaridade e proliferação descontrolada destas~\hyperref[csl:32]{(32)}.~

~A nível histológico, foi comprovado que o BPA altera estruturalmente a
glândula mamária. Em estudos com~ratinhos~adultos do sexo feminino, foi
observado que a exposição ao composto causou um aumento no número de
ductos e ácinos mamários. Este aumento foi acompanhado de hiperplasia do
sistema de ductos, resultado da proliferação excessiva do epitélio de
revestimento,\,sendo que as\,células apresentavam núcleos aumentados com
forma variável e de tonalidade escura.\,De facto, a exposição ao BPA
aumentou a densidade ductal e a sensibilidade ao estrogénio,
características do carcinoma mamário ~\hyperref[csl:26]{(26)}. Foi também
descrita, uma subida significativa na percentagem de ductos e~brotos
terminais~(BTs).\,Relativamente à proliferação epitelial,
os~ratinhos~tratados com BPA registaram um aumento significativo, em
relação aos~ratinhos~controlo. Assim, os animais expostos ao BPA
apresentaram um aumento significativo do número médio de células por
unidade de área epitelial. Pensa-se que esta proliferação aumentada,
após exposição ao BPA, seja consequência da regulação positiva de
proteínas, como\,a p16 e a\,ciclina\,E, ambas responsáveis pela
senescência celular e indução da proliferação~ ~\hyperref[csl:33]{(33)}~.

~Por outro lado,~registou-se~um aumento na quantidade e distribuição das
fibras de colagénio, às custas dos adipócitos da região da mama.\,Um
estroma denso foi formado ao redor das estruturas epiteliais mamárias
com infiltrado celular mononuclear, substituindo o tecido adiposo
normal~ ~\hyperref[csl:31]{(31)}~ ~.

Outros estudos documentaram que a exposição ao BPA promove a maturação
da camada de gordura da região mamária e leva à alteração da organização
do colagénio, especialmente na
área\,peritubular~\hyperref[csl:33]{(33)}.\,\,Além de promover
a\,adipogénese, através de alterações do\,transcriptoma,\,o BPA provoca
o aumento da expressão de genes
envolvidos\,na\,diferenciação\,mioepitelial\,e, como mencionado
anteriormente, a diminuição de genes envolvidos na adesão celular. Em
relação à apoptose, demonstrou-se que o BPA \,aumenta a expressão de
genes relacionados com a prevenção da apoptose e\,pró-apoptóticos
~\hyperref[csl:31]{(31)}~ ~ .

~Além dos testes em~ratinhos, a\,exposição de macacos ao BPA\,permitiu
verificar uma\,hiperplasia dos\,ductos\,mamários\,e\,a\,proliferação
epitelial\,intraductal, levando a um aumento na densidade dos\,BTs e ao
desenvolvimento avançado da glândula, em comparação com os animais não
expostos\hyperref[csl:34]{(34)}.\,

~

Atualmente, é observado um número crescente de estudos que recorrem aos
modelos~de cultura celular~3D, dado que\,fornecem uma
abordagem\,ex\,vivo\,mais próxima das condições fisiológicas, quando
comparados com os modelos de cultura de células 2D. Relativamente aos
testes que avaliam o efeito do BPA nas células mamárias, é possível que
o ambiente 3D permita a transferência de sinais,\,através das integrinas
ou outras moléculas\,que estão em contacto com a matriz
extracelular,~tornando\,as células mais suscetíveis aos efeitos\,deste
DEQ.\, Através da análise de modelos 3D da glândula mamária, foi
comprovado que o BPA leva à desorganização do epitélio e promove a
migração das células para o lúmen, o que pode indicar que este tem a
capacidade de afetar a\,tumorigenicidade. Ao serem tratadas com baixas
quantidades (0,1\,\selectlanguage{greek}µ\selectlanguage{english}M) de BPA, as c\selectlanguage{ngerman}élulas epiteliais\,luminais\,MCF-12
utilizadas na construção do modelo 3D, preencheram o lúmen dos ácinos da
glândula e quebraram a organização\,acinar. Este facto levanta a
possibilidade de que o BPA\,pode\,afetar a progressão ou iniciação do
cancro da mama~\hyperref[csl:32]{(32)}.\,

\,

\section*{3. Alterações
epigenéticas~}

{\label{880977}}

~

Os padrões epigenéticos\,de\,metilação são primariamente estabelecidos
durante o período embrionário e\,mantêm-se\,ao longo da vida,
influenciando a expressão genética nos diferentes órgãos e tipos
celulares. Assim, a embriogénese é\,o período mais suscetível a
alterações epigenéticas, pelo que a exposição ao BPA durante a gravidez
assume especial relevância e\,pode ter repercussões ao nível da
carcinogénese mamária~\hyperref[csl:5]{(5)}.

~A exposição ao BPA~in\,utero\,em\,ratinhos\,mostrou
reprogramar\,significativamente\,a expressão\,de diversos genes\,através
da metilação das ilhas\,CpG.\,Após\,maturação sexual\,dos
ratinhos,\,verificaram-se alterações na\,resposta ao estrogénio em
diversos tecidos.\,Muitos dos genes com expressão aberrante estão
implicados em vias neoplásicas, por exemplo,~\,reguladores do ciclo
celular,\, permitindo relacionar a exposição deste disruptor endócrino
na vida fetal com o desenvolvimento de cancros sensíveis a estrogénios,
como o cancro da mama~\hyperref[csl:35]{(35)}.\,

~

Estudos relataram que elevadas concentrações
da\,metiltransferase\,Enhancer\,of\,Zeste\,Homolog\,2\,(EZH2) se
relacionam com formas mais agressivas do cancro da mama,
demonstrando~experimentalmente que a\,sobrexpressão\,desta promove a
proliferação celular,\,tumorogénese\,e metastização. A metilação de
histonas pela\,\,EZH2 marca o~ADN~para metilação
pelas~ADN\,metiltransferases\,e a sua\,sobreexpressão\, prejudica a
reparação do~ADN~\hyperref[csl:36]{(36}; \hyperref[csl:37]{37}; \hyperref[csl:38]{38)}. O efeito tóxico do BPA na linhagem
celular MCF-7 traduziu-se no aumento da expressão de\,EZH2\,. Efeitos
semelhantes foram relatados na glândula mamária adulta, quando a
exposição era feita\,in\,utero~\hyperref[csl:36]{(36)}.

\,~

Os genes BRCA1 e BRCA2 codificam reguladores da reparação das quebras
de~ADN~de cadeia dupla, tendo um papel crucial enquanto genes
supressores de tumores, provavelmente por prevenirem mutações e
instabilidade genómica. A metilação destes genes associa-se ao
desenvolvimento de certas neoplasias como o cancro da
mama~\hyperref[csl:39]{(39}; \hyperref[csl:40]{40}; \hyperref[csl:31]{31)}.\,O tratamento de células epiteliais mamárias
humanas com BPA provocou a\,hipermetilação\,dos promotores de diversos
genes, incluindo o BRCA1,~inativando-o \hyperref[csl:41]{(41)}.~

\,~

Relativamente aos\,microARNs, a exposição ao BPA demonstrou
alterar\,significativamente\,os\,níveis\,de expressão de\, vinte e cinco
microARNs\,em três tipos de
células~placentárias~\hyperref[csl:42]{(42)}.\,São~especialmente relevantes
as alterações\,dos\,onco-miR,\,miARNs\,que, quando alterados, \,podem
levar a processos carcinogénicos~\hyperref[csl:43]{(43)}.\,Em~particular,~a
exposição~da linhagem MCF-7\,ao BPA\, aumentou a expressão dos miR-19a e
miR-19b~oncogénicos, consequentemente, alterou a expressão~de certas
proteínas que estes regulam. Nomeadamente,~causou a diminuição da
expressão dos supressores de tumores PTEN e p53, provocando um aumento
da proliferação celular.~Determinou-se~que~estes\,miARNs\,tinham um
papel importante no aumento da proliferação das células da linhagem
MCF-7~\hyperref[csl:44]{(44)}.~

~

O~ARN~longo não codificante HOTAIR\,é altamente expresso em diversos
tipos de cancros, como o\,cancro da mama,\,e é
regulado\,transcricionalmente\,pelo estradiol. Um estudo demonstrou
que\,esta regulação,\,em células de\,cancro\,da\,mama MCF-7, é
coordenada\,por meio de\,REs\,e
vários\,correguladores\,de\,RE.\,O~ARN\,HOTAIR é induzido
significativamente após exposição a baixas concentrações de BPA\,in
vitro, em\,células\,MCF-7.\,Verificou-se também\,um aumento
na\,expressão de HOTAIR nas glândulas mamárias de\,ratinhos,\,após o
tratamento com BPA, indicando\,a potencial
desregulação\,endócrina\,mediada por\,este disruptor\,in
vivo~\hyperref[csl:45]{(45)}.\,

\par\null

Em síntese, as alterações epigenéticas induzidas pelo BPA demonstram
reprogramar a expressão de diversos genes implicados no cancro da mama.
Destacam-se os genes EZH2, BRCA1 e BRCA2, o ARN longo não codificante
HOTAIR e os microARNs oncogénicos miR-19a e miR-19b. Estas alterações
contribuíram para o processo carcinogénico ao diminuírem a expressão de
genes supressores de tumores, levando a um aumento da instabilidade
genómica, desregulação da proliferação celular e indução de
metastização.~

\par\null

~

\section*{4.
Células\,Estaminais\,Cancerígenas\,\,~}

{\label{497020}}\par\null

Tem sido demonstrado, nos últimos anos, que a exposição a~DEQs, como o
BPA, ocorre ao longo da vida, podendo mesmo ocorrer ainda durante a
embriogénese.~Uma exposição pré-natal ao BPA induz mudanças no
compartimento epitelial e no estroma da glândula mamária fetal de
ratinhos, favorecendo a suscetibilidade a oncogenes. As
células~constituintes do estroma mamário, como fibroblastos, adipócitos,
células hematopoiéticas, entre outras,~libertam moléculas essenciais
para a regulação da função e diferenciação epiteliais.\, As células
epiteliais da glândula mamária são geradas a partir de células mamárias
estaminais (CEMas), e~as do compartimento estromal, a partir de células
estaminais mesenquimais (CEMs) ~\hyperref[csl:31]{(31}; \hyperref[csl:13]{13)}~.

~As~CEMas~são uma classe de células que se encontram ativas durante toda
a~vida, tendo um papel fundamental no desenvolvimento da glândula
mamária, na homeostasia do tecido e na patologia.\,Propriedades~destas
células, como um período de vida longo e uma baixa taxa de divisão,
fazem~delas alvos privilegiados~da exposição a longo prazo ao
BPA.~Assim,~a função normal destas células~é propensa a ser afetada após
exposição ao BPA~ ~\hyperref[csl:31]{(31}; \hyperref[csl:13]{13)}~.

\par\null

O tratamento com BPA aumenta\,as\,características\,de\,células
embrionárias, ao induzir a expressão~dos genes ALDH1~e SOX2, um marcador
e um regulador da~pluripotência~de~células\,estaminais, respetivamente.
Ademais, ativa a via da PI3K/AKT, levando a uma\,subregulação~dos genes
epiteliais associados a uma~sobrerregulação~de genes mesenquimais.\,
~\hyperref[csl:31]{(31}; \hyperref[csl:13]{13)} ~

No que diz respeito às células estaminais cancerígenas, a sua capacidade
de autorrenovação permite~o~sustento~do crescimento da neoplasia
mamária. Nestas células, os fatores de transcrição reguladores
da~pluripotência, como o SOX2, são altamente expressos, provocando a
ativação contínua da capacidade de autorrenovação destas células.
Consequentemente,\,o BPA\,leva a transformação oncogénica, iniciação e
manutenção de neoplasias mamárias~\hyperref[csl:46]{(46)}.~

~

O~BPA também modifica~a~via das proteínas morfogénicas ósseas
(PMOs),~particularmente ao nível da~expressão e localização dos
recetores das~PMOs~(RPMOs),~conduzindo~a transformações das células
embrionárias mamárias.~Esta via~é uma das vias de regulação
das~CEMas~mais conservadas~desde a embriogénese até à vida adulta,
participando nos passos iniciais da génese da glândula mamária e
da~morfogénese da ramificação ductal, na formação dos brotos mamários~e
na~compartimentalização~mioepitelial.~~As~PMOs~também regulam
as~CEMs,~as quais~dão origem às~células do~estroma~mamário~que,
por~sua~vez,~contribuem para a produção das~PMOs~
~\hyperref[csl:13]{(13)}.~Existem vinte e uma moléculas de~PMOs~solúveis que
agem através de recetores tirosina-cinase, sendo as mais importantes
as~PMO2 e PMO4.~O mecanismo através do qual as~PMOs~interagem com
o\,RE\,permanece desconhecido~ ~\hyperref[csl:31]{(31}; \hyperref[csl:13]{13)}~~.

~ ~

~

O BPA provoca alterações não~genotóxicas~e~genotóxicas~nas células
estaminais e nos seus nichos,\,atuando~cinergeticamente~no início do
processo de formação da neoplasia mamária.\,Os
mecanismos~epigenéticos~despoletados pelo BPA~que~modulam a sinalização
das~PMOs~incluem a metilação dos promotores dos RPMOs. O DNp63, um
regulador negativo da~expressão dos~genes supressores de tumores~p53 e
BRCA1, medeia a ativação da sinalização das PMOs, afetando a
plasticidade e a~tumorigenicidade~durante o início e a progressão da
neoplasia mamária~ ~\hyperref[csl:13]{(13)}~ ~ ~ ~.

\par\null

~A~PMO4 modula as~CEMas~e os progenitores mioepiteliais, sendo expressa
pelas células epiteliais e por células mesenquimais. A PMO2 permite a
diferenciação dos progenitores~luminais~e regula as células
epiteliais~luminais, ao modular a~expressão de GATA-3 e de FOXA1. Na
ausência de BPA, a produção de PMO2 pelo microambiente da glândula
mamária e a expressão de~RPMOs~pelas células epiteliais mamárias
sustenta a homeostasia da glândula.~No caso de exposição ao\,BPA,\,este
estimula a produção de PMO2 pelos fibroblastos mamários. Uma exposição
crónica à PMO2 ativa uma cascata dependente do~RPMO1B que leva a um
desequilíbrio entre FOXA1 e FOXC1,~a favor do FOXA1 e a
uma~sobreregulação~do GATA-3.~Ademais, o BPA aumenta a expressão e a
localização dos~RPMOs ~\hyperref[csl:31]{(31}; \hyperref[csl:13]{13)} .~~~~~

\par\null

Juntamente\,com o BPA,~a PMO2 estimula~a produção de interleucina 6
pelos adipócitos. A interleucina 6,~por sua vez,~aumenta a produção
de~PMO2 pelos fibroblastos do microambiente da glândula mamária. A
desregulação da via das~PMOs~e o contexto inflamatório\,promovido pela
IL-6 cooperam a favor da transformação das CEMas~\hyperref[csl:13]{(13)}
.\,\,~

~

Assim, a via das~PMOs~pode ser alterada pelo BPA, quer ao nível das
células estaminais, quer do seu microambiente, através da indução da
síntese de níveis elevados da PMO2 por fibroblastos e outras células\,do
estroma. Além disso, o BPA promove uma sobreativação da via PMO2/RPMO1B
em tumores RE+ . Deste modo, a deteção precoce do aumento dos níveis de
PMO2 no microambiente mamário pode constituir um marcador fiável do
processo de transformação celular inicial~~\hyperref[csl:31]{(31}; \hyperref[csl:13]{13)}~.~

~

~

~\textbf{CONCLUSÃO~E PERSPETIVAS FUTURAS}

~

Neste~artigo, foram~resumidas evidências científicas atuais
relativas\,aos efeitos do BPA\,na carcinogénese do cancro da mama,
por~intermédio\,dos~recetores de estrogénio, nomeadamente, a nível
histológico, epigenético e molecular.\,~Nas últimas décadas, foram
realizados diversos estudos que permitem concluir~que o BPA tem a
capacidade de agir como\,carcinógenio\,e, consequentemente, de induzir
lesões neoplásicas e tumores malignos na glândula mamária.~Assim,
o\,conhecimento\,sobre estes efeitos do BPA\,assume particular interesse
devido às propriedades miméticas do\,estrogénio que o
BPA\,apresenta,\,à\,sua presença\,assídua no nosso dia-a-dia e ao facto
de o cancro da mama apresentar uma taxa de incidência elevada.\,~Apesar
de estudos epidemiológicos e experimentais terem demonstrado que o~BPA
contribui para o desenvolvimento de cancro da mama, os
mecanismos~inerentes\,não são ainda totalmente compreendidos.\,~Por
exemplo, quantidades de BPA têm sido detetadas em amostras de tecido
adiposo da glândula mamária,\,tornando-se crucial estudar a influência
do BPA na diferenciação e maturação dos adipócitos, já que pesquisas
nesta~área podem elucidar\,sobre\,outros~mecanismos desencadeados pelo
BPA e~que\,levam~à carcinogénese ~\hyperref[csl:47]{(47)} . Ademais,~ o
mecanismo através do qual as PMOs interagem com o RE ainda não foi
elucidado. Uma vez que a interferência do BPA na via das PMOs foi uma
descoberta recente,~ são necessários mais estudos no sentido de
compreender os mecanismos subjacentes~\hyperref[csl:31]{(31}; \hyperref[csl:13]{13)}.~ ~

~

Dado que o BPA está bastante presente no ambiente, interagirá, quase
inevitavelmente, com outros compostos, como os radicais cloro. Esta
interação leva à formação de compostos com mais\,atividade
estrogénica\,que o próprio BPA. Assim, será de especial relevância, no
futuro próximo, estudar e analisar a transformação ambiental do BPA, de
forma a compreender melhor o seu papel na carcinogénese\,\,~
~\hyperref[csl:47]{(47)}~.

~

Devido às restrições associadas ao uso do BPA, certas empresas
desenvolveram substitutos deste, que são usados atualmente, como o
Bisfenol S (BPS) e F (BPF). Contudo, estes compostos são estruturalmente
semelhantes ao BPA, tendo já sido verificado em alguns estudos que podem
ter efeitos estrogénicos semelhantes ou mais intensos que o BPA. Estudos
recentes demonstraram que estes dois compostos induzem danos no~ADN e
diminuem a viabilidade celular. Deste\,modo, estudos posteriores acerca
destes substitutos serão importantes para elucidar a influência do BPA
no processo carcinogénico, além de permitir averiguar quais os efeitos
adversos esperados resultantes da exposição ao BPS e BPF~
~\hyperref[csl:47]{(47)}.

\selectlanguage{portuguese}
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